1. 概述
點擊化學描述了在溫和水溶液中快速選擇性地“點擊”反應成對官能團。 Click Chemistry 的概念已轉(zhuǎn)變?yōu)榉奖?、通用且可靠的分?A 和 B 的兩步偶聯(lián)程序,廣泛用于生物科學、藥物發(fā)現(xiàn)和材料科學。
PuriMagTM G-DBCO 磁珠是DBCO(Dibenzocyclooctyne)衍生物與超順磁性納米級磁珠共價偶聯(lián)而成,能在溫和的條件下通過無 Cu(I) 的CLICK點擊化學反應快速、高效、自發(fā)地共價捕獲疊氮化物標記功能化的(Azide-tagged)的生物分子,以進行標記、追蹤、純化或分離,可以用于蛋白-蛋白、蛋白-生物分子、DNA-蛋白的相互作用研究等,是醫(yī)學和生命學研究中的重要工具。感興趣的蛋白質(zhì)需要進行代謝、酶促或化學的方法進行疊氮化標記。
*DBCO is also known as ADIBO (= Azadibenzocyclooctyne) or DIBAC (= Dibenzoazacyclooctyne)
DBCO,即Dibenzocyclooctyne或Dibenzylcyclooctyne,中文名為二苯并氮雜環(huán)辛炔,它與疊氮化物(Azide)是生物正交偶聯(lián)時的配對聯(lián)用化合物,可以在生物體系中發(fā)生環(huán)張力促進的疊氮-炔環(huán)加成(Strain-promoted azide-alkyne cycloaddition, SPAAC)反應,該反應條件溫和,不需要任何催化劑,不影響正常的生物過程,在細胞或者復雜的細胞或組織裂解液中幾乎沒有脫靶標記。該反應是最常見的點擊化學(Click chemistry)反應之一,廣泛應用于生物偶聯(lián)和標記等,是無催化劑生物連接的強有力工具。
點擊化學的優(yōu)勢:
? 高選擇性、低背景標記:CLICK 官能團對天然存在的官能團(生物正交)如胺類呈惰性;
? 快速定量標記;
? 允許對體外和體內(nèi)酶活性進行非放射性分析:小尺寸的 CLICK 官能團具有出色的底物特性;
PuriMagTM磁珠偶聯(lián)原理示意圖:
2. 產(chǎn)品信息
Product Specifications
Description
Polymer coated Fe3O4 nanoparticles
Particle Size
200 nm
Number of Beads
~1.7×1010 beads/mg
Matrix
Proprietary polymer
Functional group
DBCO group
Group density
~100 μmole / g of Beads
Magnetization
60~70 EMU/g
Formulation
10mg/mL in DI water
Storage
1 year at 2~8 ℃. Do not freeze.
3. 使用方法
將約1 mg上述DBCO磁性納米顆粒與60uM的疊氮標記的配體在100ul的PBS緩沖液(pH=7.0)中,30℃混合反應2h。
通過磁分離回收產(chǎn)物,并用PBS(pH 7.0)洗滌。
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