【產(chǎn)品介紹】
磁珠法質(zhì)粒DNA中量抽提試劑盒是普睿邁格生物科技有限公司最新研制的一種細(xì)菌質(zhì)粒DNA中量抽提試劑盒。本產(chǎn)品將磁性納米分離技術(shù)和細(xì)菌細(xì)胞的SDS堿裂解法結(jié)合可以簡單、快速、低成本的從重組大腸桿菌培養(yǎng)物中提取高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。在離心力的作用下細(xì)胞碎片和SDS復(fù)合物沉淀下來。在一定的條件下磁珠能很好的吸附存在于上清中的質(zhì)粒DNA，其他雜質(zhì)如蛋白質(zhì)、鹽離子等通過洗滌被除去。當(dāng)條件改變時(shí)，磁珠釋放吸附的質(zhì)粒DNA?？稍?5分鐘內(nèi)從20-40ml的Luria Broth (LB)培養(yǎng)基中回收出多達(dá)300 μg的質(zhì)粒DNA。請(qǐng)注意，實(shí)際得率和最佳的培養(yǎng)物體積取決于質(zhì)粒和培養(yǎng)基。由本試劑盒抽提得到的質(zhì)粒純度高，OD260/OD280比值一般為1.7~1.9之間，OD260/OD230比值大于2.0，可直接用于轉(zhuǎn)化、DNA測序、PCR、基于PCR的突變、體外轉(zhuǎn)錄和酶切等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
【特點(diǎn)】
l 從20-40 ml過夜培養(yǎng)菌液（OD600 = 2.0）中可獲得超過300 μg的質(zhì)粒DNA；
l 與同類產(chǎn)品相比，提取效率更高，獲得質(zhì)粒的純度更高；
l 與柱式法相比，可大大減少離心次數(shù)，獲得完整性更好的質(zhì)粒；
l 可以同時(shí)處理多個(gè)樣品，實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒提取的高通量化和自動(dòng)化。
【保存方法及注意事項(xiàng)】
請(qǐng)將試劑盒中的PuriMag Beads和RNase A置于2-8℃保存，其余試劑室溫保存，有效期詳見包裝。
l 嚴(yán)禁冰凍、離心。冰凍、離心可能會(huì)對(duì)磁珠造成不可逆的損害。
l 磁珠長期放置后會(huì)聚集成團(tuán)，從而使磁珠表面積減小，降低樣品回收得率，使用前一定要渦旋振蕩徹底混勻磁珠（通常需渦旋振蕩20秒）。
【試劑盒組成】
組分
10次
保存
Resuspension solution
40 ml
2-8℃
Lysis buffer
Neutralization solution
Wash buffer
75%乙醇（用戶自備）
Elution buffer
10 ml
PuriMag bead
4 ml
RNase A
2 ml
異丙醇
用戶自備
常溫
DNA濃度及純度檢測 ：（1）得到的基因組DNA片段大小與樣品保存時(shí)間、操作過程中剪切力等因素有關(guān)，所得DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度和純度。 （2）DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260=1相當(dāng)于大約50ng/ul雙鏈DNA，40ng/ul單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7~1.9，如果洗脫時(shí)使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)?span>pH和離子會(huì)影響吸光度，并不表示純度低。
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