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更新：2025-3-17 21:30:15??????點(diǎn)擊：

產(chǎn)品介紹

采用特殊設(shè)計(jì)的磁性顆粒高效還原蛋白質(zhì)、多肽及其他含二硫鍵分子的二硫鍵。TCEP（三(2-羧乙基)膦）磁性顆?？杀苊鈧鹘y(tǒng)離心柱或重力流柱分離還原樣品與還原劑的耗時操作。

固定化 TCEP 磁珠的核心優(yōu)勢

快速分離：通過磁珠固定 TCEP，可快速從反應(yīng)體系中移除還原劑，減少下游實(shí)驗(yàn)干擾。

理化特性：TCEP 作為一種水溶性、無味、無毒且高度穩(wěn)定的蛋白質(zhì)還原劑，是替代 β-巰基乙醇和 DTT（二硫蘇糖醇）的理想選擇。其優(yōu)勢在于：

產(chǎn)品特性

基團(tuán)密度：25~40 微摩爾/克磁珠
顆粒形態(tài)：超順磁性微球
粒徑：標(biāo)稱直徑 0.2 微米
儲存條件：
- 保存于 20% 乙醇、1 mM EDTA 溶液中（濃度 10 mg/mL），2~8°C 避光儲存，禁止冷凍
- 運(yùn)輸溫度：常溫（短期運(yùn)輸不影響活性）
- 有效期：妥善儲存及操作條件下，保質(zhì)期 1 年

操作要點(diǎn)

反應(yīng)適用性
- pH 范圍：pH 4.0-9.0（廣譜兼容）
- 溫度范圍：5-95°C（適用于多數(shù)溫控策略）
變性劑使用規(guī)范
- 常規(guī)推薦：大多數(shù)蛋白質(zhì)無需變性劑即可有效還原
- 深層處理建議：對于含內(nèi)部二硫鍵的復(fù)雜結(jié)構(gòu)，可添加 6M 鹽酸胍暴露隱藏位點(diǎn)以確保完全還原
- 禁用說明：避免使用尿素，因其生成的氰酸鹽會與巰基發(fā)生副反應(yīng)
離子干擾控制
- 還原緩沖液中需添加 5-20 mM EDTA，以螯合 Zn2?、Cu2?、Mg2? 等二價(jià)金屬離子，防止巰基再氧化
樣品處理時效性
- 還原后的樣品應(yīng)立即使用，避免二硫鍵重新形成

標(biāo)準(zhǔn)操作流程（示例）
注：建議通過預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化磁珠用量（可根據(jù)需求按比例擴(kuò)增或縮減體系）

緩沖液配制

操作步驟
A. 磁珠預(yù)處理

懸浮磁珠：取適量磁珠，用超純水配制 50 mg/mL 懸浮液
關(guān)鍵提示：
- 現(xiàn)配現(xiàn)用效果最佳，4°C 短期儲存不超過 1 周（活性無顯著衰減）
混懸磁珠：使用前渦旋振蕩或搖勻至磁珠完全分散
注意：磁珠靜置后需在 2 分鐘內(nèi)分裝使用，防止沉降

B. 樣品處理

轉(zhuǎn)移磁珠：將所需量的磁性顆粒轉(zhuǎn)移至離心管
注：需根據(jù)實(shí)驗(yàn)體系優(yōu)化磁珠用量，典型配比為：
- 磁珠用量：30-50μl（對應(yīng)3-5mg磁珠）
- 樣品體積：30-50μl（含50-80μg蛋白/多肽）
磁場分離：將離心管置于磁力架上靜置1-3分鐘，待上清澄清后，趁管身仍在磁架上移除上清
樣品混合：
- 輕柔混勻法：用移液器反復(fù)吹打25次（約1分鐘）
- 快速混勻法：渦旋振蕩5分鐘（2000 rpm）
還原反應(yīng)：室溫下端對端旋轉(zhuǎn)孵育1小時
產(chǎn)物分離：再次將管置于磁力架1-3分鐘，磁吸狀態(tài)下將上清轉(zhuǎn)移至新管

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