不同pH磷酸緩沖液（PB buffer）的配制方法介紹
磷酸緩沖液也叫做磷酸鹽緩沖液，英文名為Phosphate Buffer，是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，磷酸緩沖液的配制我們一起來(lái)了解一下。首先，按照下表所給定的體積，混合1 mol/L 的磷酸二氫鈉(單堿)和1mol/L 磷酸氫二鈉(雙堿)貯液，獲得所需pH的磷酸緩沖液。
配制1 mol/L 的磷酸二氫鈉(NaH2PO4?H2O)貯液：溶解138g于足量水中，使終體積為1L; 1mol/L 磷酸氫二鈉(Na2HPO4)貯液:溶解142g于足量水中使終體積為1L。
1mol/L 磷酸二氫鈉(ml) lmol/L 磷酸氫二鈉(ml) 最終pH值
877 133 6.0
850 150 6.1
815 185 6.2
775 225 6.3
735 265 6.4
685 315 6.5
625 375 6.6
565 435 6.7
510 490 6.8
450 550 6.9
390 610 7.0
330 670 7.1
280 720 7.2
0.1mol/L是在1L水中含有的磷酸鹽物質(zhì)的總摩爾。 用磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉做緩沖液其濃度為：
磷酸氫二鈉20.7472g/L; 磷酸二氫鈉3.1167g/L。即若配制100mL，則在100ml水中加入2.0747g磷酸氫二鈉和0.3117g磷酸二氫鈉。
通常使用的磷酸鈉緩沖液有磷酸鈉緩沖液(NaH2PO4&Na2HPO4)和磷酸鉀緩沖液 (K2HPO4&KH2PO4)，由于它們有二級(jí)解離，緩沖的pH值范圍很廣。那么，各種PH值的磷酸鹽緩沖液如何配置?
各種PH值的磷酸鹽緩沖液的配制
磷酸鹽緩沖液
取磷酸二氫鈉38.0g，與磷酸氫二鈉5.04g,加水使成1000ml,即得。
磷酸鹽緩沖液(pH2.0)
甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，搖勻。乙液：取磷酸氫二鈉71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml與乙液27.5ml混合，搖勻，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH2.5)
取磷酸二氫鉀100g，加水800ml，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.5,用水稀釋至1000ml。
磷酸鹽緩沖液(pH5.0)
取0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液一定量,用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至5.0，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH5.8)
取磷酸二氫鉀8.34g與磷酸氫二鉀0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH6.5)
取磷酸二氫鉀0.68g,加0.1mol/L氫氧化鈉溶液15.2ml，用水稀釋至100ml，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH6.6)
取磷酸二氫鈉1.74g、磷酸氫二鈉2.7g與氯化鈉1.7g，加水使溶解成400ml，即得。
磷酸鹽緩沖液(含胰酶)(pH6.8)
取磷酸二氫鉀6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8;另取胰酶10g，加水適量使溶解，將兩液混合后,加水稀釋至1000ml，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH6.8)
取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液250ml，加0.2mol/L氫氧化鈉溶液118ml，用水稀釋至1000ml，搖勻，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH7.0)
取磷酸二氫鉀0.68g，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液29.1ml，用水稀釋至100ml，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH7.2)
取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液50ml與0.2mol/L氫氧化鈉溶液35ml，加新沸過的冷水稀釋至200ml，搖勻，即得。 磷酸鹽緩沖液(pH7.3)
取磷酸氫二鈉1.9734g與磷酸二氫鉀0.2245g,加水使溶解成1000ml，調(diào)節(jié)pH值至7.3，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH7.4)
取磷酸二氫鉀1.36g， 加0.1mol/L氫氧化鈉溶液79ml，用水稀釋至200ml，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH7.6)
取磷酸二氫鉀27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氫氧化鈉溶液42.4ml，再加水稀釋至200ml，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH7.8)
甲液：取磷酸氫二鈉35.9g，加水溶解，并稀釋至500ml。
乙液：取磷酸二氫鈉2.76g，加水溶解，并稀釋至100ml。取上述甲液91.5ml與乙液8.5ml混合，搖勻，即得。
磷酸鹽緩沖液(pH7.8～8.0)
取磷酸氫二鉀5.59g與磷酸二氫鉀0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。
上文就是對(duì)磷酸緩沖液的配制的介紹，磷酸緩沖液易配制各種濃度的緩沖液，而且適用的pH值范圍寬，可配置各種pH值的緩沖液，同時(shí)pH受溫度影響較小，還具有較強(qiáng)的緩沖能力緩沖液被稀釋后pH變化小。
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