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通過指數(shù)富集進(jìn)行適配體的系統(tǒng)進(jìn)化是選擇適體的傳統(tǒng)方法，在生物傳感領(lǐng)域具有巨大的潛力。然而，在選擇之前對(duì)DNA文庫或靶標(biāo)進(jìn)行化學(xué)修飾可能會(huì)阻止適體與其靶標(biāo)之間的真正識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)。在這項(xiàng)研究中，開發(fā)了基于標(biāo)簽和無修飾的原位選擇策略來克服此限制。該策略是嘗試根據(jù)電泳遷移率變動(dòng)分析的原理篩選牛血清白蛋白適體，并允許單鏈DNA序列充分暴露以與預(yù)先與瓊脂糖凝膠混合的牛血清白蛋白相互作用。經(jīng)過八輪選擇，選擇具有低解離常數(shù)（Kd）值為69.44±7.60 nM的特定適體，并將其用于后續(xù)的熒光生物傳感器的建立。經(jīng)過優(yōu)化后，最佳適體傳感器對(duì)牛血清白蛋白顯示出高靈敏度，檢出限為0.24 ng / mL（線性范圍為1至120 ng / mL）。這些結(jié)果表明，這項(xiàng)工作中提出的基于標(biāo)記和無修飾的原位選擇策略可以有效地選擇特定的適體，從而開發(fā)出適用于實(shí)際復(fù)雜樣品中牛血清白蛋白或其他靶標(biāo)的靈敏檢測的適體傳感器。

Label‐and modification‐free‐based in situ selection of bovine serum albumin specific aptamer