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【產(chǎn)品介紹】
磁珠法PCR產(chǎn)物純化試劑盒是普睿邁格生物科技有限公司最新研制的一種PCR產(chǎn)物純化試劑盒。本試劑盒是利用磁性納米分離技術(shù)從PCR反應(yīng)產(chǎn)物及其他酶促反應(yīng)物中，簡(jiǎn)單、快速、高效提取純化高質(zhì)量DNA，并能有效的除去蛋白質(zhì)，dNTP，引物等雜質(zhì)，適用于自動(dòng)化核酸純化平臺(tái)，純化后的DNA A260/A280的比值在1.7-1.9之間，A260/A230的比值通常在2.0以上，可以應(yīng)用到各類下游分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
【特點(diǎn)】
l 適用范圍廣，回收效率高，對(duì)于100 bp~50 kb之間的DNA片段回收效率在95%以上。
l 樣品體積范圍廣，不需要離心。
l 操作簡(jiǎn)單快速，20~30min完成核酸純化。
l 實(shí)現(xiàn)核酸純化高通量化和自動(dòng)化。
【保存方法及注意事項(xiàng)】
請(qǐng)將試劑盒中的PuriMag Beads置于2-8℃保存，其余試劑室溫保存，有效期詳見包裝。
l 嚴(yán)禁冰凍、離心。冰凍、離心可能會(huì)對(duì)磁珠造成不可逆的損害。
l 磁珠長(zhǎng)期放置后會(huì)聚集成團(tuán)，從而使磁珠表面積減小，降低樣品回收得率，使用前一定要渦旋振蕩徹底混勻磁珠（通常需渦旋振蕩20秒）。
l 本試劑盒不適用于純化回收小于100 bp的DNA片段，如果要回收小于100bp的DNA片段，可將PuriMag PCRbead的用量增加到樣品體積的4倍。
【純化回收得率的計(jì)算】
建議通過(guò)瓊脂糖電泳純化前后的樣品進(jìn)行回收得率的計(jì)算，不建議通過(guò)260nm處的光吸收值來(lái)計(jì)算回收得率。溶液中單鏈、雙鏈DNA和dNTP以及一些純化前的某些雜質(zhì)在260nm處都有光吸收，這樣在計(jì)算回收前樣品中DNA濃度時(shí)會(huì)得到一個(gè)虛高的DNA濃度值。
【試劑盒組成】
組分
100次
保存
PuriMag PCRbead
4 ml
2-8℃
Wash buffer
75%乙醇（用戶自備）
常溫
Elution buffer
5 ml
異丙醇
用戶自備
DNA濃度及純度檢測(cè) ：（1）得到的基因組DNA片段大小與樣品保存時(shí)間、操作過(guò)程中剪切力等因素有關(guān)，所得DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度和純度。 （2）DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260=1相當(dāng)于大約50ng/ul雙鏈DNA，40ng/ul單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7~1.9，如果洗脫時(shí)使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)?/strong>pH和離子會(huì)影響吸光度，并不表示純度低。
【操作步驟】
結(jié)合→
1) 向1.5 ml的離心管或PCR管中加入待純化的PCR產(chǎn)物， 然后加入2倍樣品體積的PuriMag PCRbead，顛倒混勻數(shù)次，磁分離后吸棄上清液。
洗滌→
2) 向離心管中加入150 μl Wash buffer，移液槍緩慢吹打混勻，靜置1 min，于磁力架上靜置20 s，小心吸棄上清液。重復(fù)該步驟一次。上清液盡量移除干凈，室溫晾干5 min，讓殘留乙醇揮發(fā)干凈，以免影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
洗脫→
3) 向離心管中加入10~50 ul的Elution buffer（Elution buffer在65-70 ℃中預(yù)熱后洗脫效果更好，減小洗脫體積或多次洗脫可增大DNA濃度），移液槍緩慢吹打混勻1~2 min，將離心管放到磁力架上靜置20 s，小心將上清液吸入新離心管中，即為純化的PCR產(chǎn)物，可存放于2~8 ℃，長(zhǎng)期存放需放置于-20 ℃。
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