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抗原/抗體法快速檢測新型冠狀病毒膠體金試紙原理

2020-4-11 13:44:46點擊:


新冠病毒


膠體金試紙,實際上就是用一種膠體形式的金標記生物大分子,并在PVC材質(zhì)的試紙固定,留上加樣孔,設(shè)上檢測線和質(zhì)量控制線,這樣樣品在加樣孔加上之后,再滴加幾滴液體介質(zhì),讓液流向試紙另一端的吸水墊進行流動,試紙上進行層析,一般10~15分鐘,等試紙上的免疫反應(yīng)發(fā)生之后,就可以看到膠體金聚集的位置上有沒有紅色條帶出現(xiàn),肉眼可見的,這樣就知道檢測結(jié)果了。


目前新型冠狀病毒上已經(jīng)宣傳報道的有兩種膠體金試紙,一種是是檢測新型冠狀病毒的抗原。

這種方法利用的是雙抗體夾心法,也就是針對同一種抗原,試紙上有兩種抗體存在,不過在試紙不同的位置上。而膠體金標記的抗體是其中一種 針對抗原的抗體,在試紙的結(jié)合墊上。


比如咽拭子、鼻拭子、肺泡灌洗液的樣本滴上加樣孔之后,再滴加幾滴流動介質(zhì),臨床樣本里假如有特異性的病毒抗原,這時候就會被結(jié)合墊上的金標抗體所識別,形成抗原抗體復(fù)合物。這時候繼續(xù)往吸水墊方向流動,在檢測線上,有另一種針對抗原的抗體,這個抗體識別的抗原表位和金標抗體是不一樣的,所以同一個抗原能夠同時被這兩種抗體所識別。這時候金標抗體就會在檢測線處被截留一部分,這樣就在檢測線上顯色了。


當然,金標抗體的量肯定是富余的,所以不會只在檢測線處被截留,還會繼續(xù)往吸水墊方向流動,這時候就有一條質(zhì)控線。線上面有的是專門針對金標抗體抗體(也就是抗-抗體,本質(zhì)是一種抗體,但是它識別的抗原對象也是一種抗體)。因為質(zhì)控線識別金標抗體的能力是非常強的,所以這條線就一定會顯色,這也是質(zhì)控的道理,如果這條線沒有顯色,那么這次檢測結(jié)果是無效的。


所以,陰陽性的判斷就很簡單了,兩條線都顯色——陽性;只有質(zhì)控線顯色——陰性;這兩種情況之外的都是無效實驗。

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