2018-1-5 20:53:24點(diǎn)擊：
鏈霉親和素（
streptavidin，SA）是由鏈霉菌streptomyces avidinii分泌的一種蛋白質(zhì)，分子量為54kD。鏈霉親和素分子由4條相同的肽鏈組成，其氨基酸組成中，甘氨酸和丙氨酸的含量較大，而且結(jié)合生物素的活性基團(tuán)也是肽鏈中的色氨酸殘基；鏈霉親和素是一種稍偏酸性（pH6.0）的蛋白質(zhì)，并且不帶任何糖基。
鏈霉親和素分子中每條肽鏈都能結(jié)合一個(gè)生物素，因此與親和素一樣，一個(gè)鏈霉親和素分子也能結(jié)合4個(gè)生物素分子，二者親和常數(shù)（K）亦為1015L／mol。在蛋白水解酶作用下，鏈霉親和素可在N端10～12和Ｃ端19-21間斷裂，形成的核心鏈霉親和素仍然保持完整的結(jié)合生物素的能力。鏈霉親和素的活性單位也是以結(jié)合1μg生物素所需的量來(lái)表示，１mg鏈霉親和素的最高活性可達(dá)18U。
相同點(diǎn)
1、 生物素結(jié)合能力：AV：13~15U，SA：14~18U
2、 活性中心依賴于色氨酸
-懶氨酸：親和素在氨基酸序列的70-70和110-111兩個(gè)位點(diǎn)有色氨酸-懶氨酸，鏈霉親和素在氨基酸序列的79-80和120-121兩個(gè)位點(diǎn)含有色氨酸-懶氨酸。
不同點(diǎn)：
1、 分子量：AV=66KD, SA=54KD
2、 等電點(diǎn)：AV=10.5, SA=6.0, AV帶正電較多，非特異性結(jié)合較強(qiáng)。
3、 位阻效應(yīng)：SA的生物素結(jié)合位點(diǎn)較AV深，位阻效應(yīng)較強(qiáng)，長(zhǎng)臂生物素更適合。
4、 生物素的結(jié)合：AV隨機(jī)結(jié)合，SA協(xié)同結(jié)合。
5、 氨基酸序列：AV含二硫鍵和10%糖，SA含甘氨酸丙氨酸較多，無(wú)糖和二硫鍵。
酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體，②酶標(biāo)記的抗原或抗體，③酶作用的底物。
根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
生物素－鏈霉親和素系統(tǒng)在ELISA中的應(yīng)用有多種形式：
1、用于間接包被：可以在固相上先預(yù)包被
鏈霉親和素，原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結(jié)合，通過
鏈霉親和素－生物素反應(yīng)而使生物素化的抗體或抗原間接包被。這種包被法主要有以下優(yōu)點(diǎn)：
① 增加吸附的抗體或抗原量，而且使其結(jié)合點(diǎn)充分暴露。
② 陰性對(duì)照、空白對(duì)照本底低，檢測(cè)敏感性高。
③ 用
鏈霉親和素替代抗體包被微孔，避免了抗體包被微孔時(shí)容易發(fā)生失活
(或不易保存)。
④ 通過生物素將抗體結(jié)合于
鏈霉親和素包被的
酶標(biāo)板上，可克服傳統(tǒng)物理吸附方法造成的抗原抗體結(jié)合能力大量喪失的不足。
⑤ 生物素標(biāo)記捕獲抗體、酶標(biāo)指示抗體和樣品中的抗原三者在均相中形成復(fù)合物后，再通過生物素結(jié)合于鏈霉親和素包被的酶標(biāo)板上，由于鏈霉親和素和生物素之間親和力極強(qiáng)，并且具有高度的特異性和穩(wěn)定性，因而可提高檢測(cè)靈敏度。
實(shí)例：CTnT檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，雙抗體夾心ELISA法最低檢測(cè)值為7.25μg/L，使用鏈霉親和素包被法最低檢測(cè)值達(dá)到1.0μg/L，較雙抗體夾心ELISA法靈敏度提高7倍。
2、 用于終反應(yīng)放大：在常規(guī)ELISA中的酶標(biāo)抗體也可用生物素化的抗體替代，然后連接親和素－酶結(jié)合物，以放大反應(yīng)信號(hào)。
由于SA的等電點(diǎn)低，表面帶的正電荷少，因此它和聚苯乙烯板載體的靜電吸附力弱，SA的陰性對(duì)照顯色明顯比AV低，這樣在ELISA上應(yīng)用SA可進(jìn)一步提高方法的靈敏度。鏈霉親和素對(duì)生物素化的抗體是一個(gè)主動(dòng)的吸附過程，生物素化的抗體吸附在鏈霉親和素表面，抗體排列整齊，分布均勻，抗體容易保持功能，而被動(dòng)吸附抗體排列極不規(guī)則容易導(dǎo)致大量抗體失去功能，所以將生物素-鏈霉親和素免疫反應(yīng)系統(tǒng)引入競(jìng)爭(zhēng)法中，可以大大提高酶聯(lián)免疫的靈敏度和特異性。
實(shí)例
1: 地高辛的生物素-鏈霉親和素免疫法測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，傳統(tǒng)方法被動(dòng)吸附只有約5％ 的抗體具有功能 ，生物素-鏈霉親和素體系中60％ 的抗體具有功能。
實(shí)例
2：淋球菌抗原測(cè)定方法實(shí)驗(yàn)中，生物素-鏈霉親和素法檢測(cè)靈敏度為0.625 μg/L，相當(dāng)于3.5×104/ml淋球菌，而同時(shí)進(jìn)行常規(guī)ELISA測(cè)定時(shí)，其靈敏度為1.25 μg/L。
用
酶或熒光素等修飾
鏈霉親和素，應(yīng)用于ELISA放大檢測(cè)信號(hào)，提高檢測(cè)靈敏度。
產(chǎn)品實(shí)例：
將
鏈霉親和素直接或間接預(yù)包被在
酶標(biāo)板上，穩(wěn)定性高，易于保存，使用時(shí)只要加入生物素化的抗體或者抗原即可。
鏈霉親和素磁珠由
超順磁微粒與高純度鏈霉親和素共價(jià)結(jié)合而成。磁珠可用于捕獲生物素標(biāo)記的底物，包括生物素標(biāo)記的抗原、抗體和核酸。由于生物素-鏈霉親和素的相互作用很強(qiáng)，其結(jié)合常值（Ka）為 1015 M-1，并且鏈霉親和素的非特異性結(jié)合率很低，使得被捕獲的底物可滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求，包括 mRNA 的分離和一抗、二抗的獲得。
產(chǎn)品實(shí)例：
產(chǎn)品描述：
鏈霉親和素包被的PuriMag G磁珠為分離生物素抗體、核酸或其他生物素配體和靶分子的最佳選擇。這種鏈霉親和素-生物素的高親和力 ( Kd值10-15 )在分子上有著廣闊的應(yīng)用。磁珠是單層而不是多層的鏈霉親和素重組體。這對(duì)自由生物素或生物素配體和靶分子而言，在空間排列有著絕大多數(shù)的生物素結(jié)合位點(diǎn)。沒有過量的物理吸附鏈霉親和素確保了只有微量的鏈霉親和素會(huì)遺漏。批次間變化小，結(jié)果重復(fù)性好。
優(yōu)點(diǎn)和特性：
? 直接快速捕獲任何生物素靶分子
? 靈活的固相操作和優(yōu)化的液相反應(yīng)動(dòng)力學(xué)
? 磁性操作易于適應(yīng)自動(dòng)化平臺(tái)
? 批次重復(fù)性高，結(jié)果可靠一致
應(yīng)用：
PuriMag G-Streptavidin已達(dá)到了前所未有的廣泛應(yīng)用。主要應(yīng)用在制備單鏈DNA模板，分離RNA和DNA結(jié)合蛋白，固定長(zhǎng)鏈DNA片段，純化測(cè)序產(chǎn)品，特效捕獲核酸。
濃度：10mg/ml
儲(chǔ)存條件：2-8℃
結(jié)合能力：
磁珠的結(jié)合能力由DNA片段長(zhǎng)度決定。 1mg磁珠結(jié)合4,000 pmoles自由生物素，400 pmoles生物素標(biāo)記的核苷酸(單鏈) ，10 - 20μg生物素標(biāo)記抗體和10 pmoles的2 - 4 kb雙鏈DNA片段。
中文名稱：PuriMag鏈霉親和素磁珠
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